58 XXXI MOSTRA UNISINOS DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA E TECNOLÓGICA De 28/10/2024 a 01/11/2024 Unisinos São Leopoldo Ciências Biológicas - PPG em Biologia Autor(a): Ana Chrystina de Souza Padilha Diedrich Coautor(es): Modalidade de Bolsa: PIBITI/CNPq Orientador(a): Profª. Drª. Larissa Rosa de Oliveira Coorientador(a): Prof. Dr. Victor Hugo Valiati ABORDAGENS METODOLÓGICAS E DESAFIOS NA EXTRAÇÃO E AMPLIFICAÇÃO DE DNA ANTIGO (ADNA) EM AMOSTRAS ÓSSEAS O aDNA, também conhecido como DNA antigo, é o material genético extraído de amostras de restos biológicos antigos. A análise de aDNA, desempenha papel fundamental em importantes áreas da ciência sendo um campo em constante desenvolvimento impulsionado pelos progressos nas metodologias de extração de DNA e de sequenciamento genético. Estudos com aDNA são essenciais ao entendimento das reconstruções da história evolutiva de espécies extintas ou não, bem como nas inferências de padrões em processos migratórios. Entretanto, as análises moleculares realizadas com aDNA extraído de ossos, enfrentam desafios devido à forma como o material foi preservado, sendo frequente encontrar amostras contaminadas pelo ambiente, fragmentadas e degradadas, resultando em uma taxa de sucesso reduzida de DNA com qualidade. Fatores abióticos podem acelerar a degradação do aDNA, dificultando ou até impossibilitando sua obtenção nos mais diferentes métodos de extração. O objetivo deste trabalho é testar diferentes protocolos de extração e amplificação de aDNA pela PCR (Reação em Cadeia da Polimerase), utilizando a região D-Loop do DNA mitocondrial para a caracterização genética das amostras. Os fragmentos de ossos de espécimes de golfinho-cabeça-de-melão, Peponocephala electra coletados no estado de Alagoas, foram enviados para o Laboratório de Ecologia de Mamíferos Marinhos- LEM da Universidade do Vale do Rio dos Sinos-Unisinos. Em ambiente esterilizado, foram extraídos 400 mg de pó de osso de cada amostra, que passou por processo de descalcificação. Em seguida foram testados quatro protocolos diferentes de extração de DNA, sendo eles: (i) Salting out, (ii) protocolo de extração de ossos com Dextran Blue, (iii) Fenol-Clorofórmio com precipita-
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