76 XXXI MOSTRA UNISINOS DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA E TECNOLÓGICA De 28/10/2024 a 01/11/2024 Unisinos São Leopoldo Ciências Biológicas - PPG em Biologia1 Autor(a): Gabriele Thais Steyer Coautor(es): Fabrício Stalter, Fernanda Rodrigues de Avila, Natasha Malgarezi Modalidade de Bolsa: UNIBITTI Orientador(a): Prof. Dr. Victor Hugo Valiati ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO DE ESTIRPES DE WOLBACHIA COM DIFERENTES TAXAS DE INFECÇÃO EM POPULAÇÕES NATURAIS DE DROSOPHILA. (DIPTERA: DROSOPHILIDAE)2 A Wolbachia pipientis é uma bactéria endossimbionte distribuída em Artrópodes e Nematódeos. Tem papel importante na evolução de seus hospedeiros por influenciar de diferentes maneiras o comportamento reprodutivo dos diferentes táxons que infectam. Ademais, diferentes taxas de infecção são encontrados nesses hospedeiros, o que interfere na reprodução e no valor adaptativo da espécie infectada. Nesse contexto, resultados preliminares sobre isolamento reprodutivo demonstraram que as fêmeas portadoras de estirpes de Wolbachia em baixa taxa apresentavam um efeito positivo na quantidade de filhotes. Para identificar uma estirpe é usado o sistema Multilocus (MLST), que muitas vezes não consegue diferenciar estirpes próximas evolutivamente, sendo necessário recorrer a sequenciamento do genoma dessas bactérias. Um dos grandes desafios neste processo é o isolamento da Wolbachia, onde acabam sendo sequenciados juntos material genético de genes mitocondriais e nucleares do hospedeiro. Então o presente trabalho buscou isolar Wolbachia, extrair o DNA e sequenciar as estirpes dessa bactéria que infectam em alta e baixa taxas as espécies Drosophila willistoni e D. paulistorum. O protocolo de isolamento escolhido foi adaptado de Andreekova (2022), com a modificação do tamanho dos poros do filtro. Em adição, implementamos metodologia para aumentar o rendimento das extrações usando-se de um kit de amplificação de DNA total, o GenomePhi. O sucesso do protocolo foi testado com diferentes marca1 Genética Animal 2 Laboratório de Genética e Biologia Molecular (LGBM) – Unisinos, Brasi
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